本标准规定了大肠杆菌PCR检测方法的技术要求。
本标准适用于大肠杆菌的诊断、监测及流行病学调查，适用于动物粪便、脏器及纯培养物中大肠杆菌的检测。
本标准中的试验操作应在生物安全Ⅱ级（BSL-2）以上的实验室进行。
前言 II
1 范围 1
2 规范性引用文件 1
3 缩略语 1
4 原理 1
5 仪器和器材 1
6 试剂和材料 1
7 操作步骤 2
71 样品的采集、前处理、存放与运输 2
711 采样注意事项 2
712 采样工具 2
713 内脏样品的采集与前处理 2
714 内容物的采集与前处理 2
715 粪便的采集与前处理 2
716 血液 2
717 大肠杆菌纯培养物 3
718 保存与运输 3
72 PCR 检测 3
721 DNA 提取 3
722 PCR 3
7222 PCR 反应条件 3
7223 电泳 4
8 试验成立的条件 4
9 结果判定 4
附录 A（规范性附录） 试剂配制 5
A1 电泳缓冲液（50 倍） 5
A11 05mol/L 乙二铵四乙酸二钠（EDTA）溶液（pH 80） 5
A12 TAE(三羟甲基氨基甲烷一乙酸)电泳缓冲液(50 倍) 5
A2 1%琼脂糖凝胶 5
